活細(xì)胞非裂解型的 Nano-Glo^?Live Cell Assay System，由于受信號(hào)衰減影響必須在 2 小時(shí)以內(nèi)完成檢測(cè)。而 Nano-Glo^?Endurazine? 和 Vivazine? 活細(xì)胞底物為 NanoLuc^??和 NanoBiT^?螢光素酶提供了活細(xì)胞檢測(cè)的可選方案，其檢測(cè)可持續(xù)數(shù)小時(shí)或數(shù)天。對(duì)于這兩種底物，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，酯水解的緩慢速率導(dǎo)致 furimazine的穩(wěn)定釋放，這個(gè)過程由細(xì)胞內(nèi)酯酶催化。一旦形成 , furimazine 即可作為 NanoLuc^??和 NanoBiT^??螢光素酶的底物。

與 Endurazine? 底物相比，Vivazine? 底物光信號(hào)更強(qiáng)，但光信號(hào)衰減速度也更快。Endurazine? 底物提供了最大的信號(hào)穩(wěn)定性，但其初始信號(hào)強(qiáng)度較低。您需要評(píng)估兩種底物來確定哪種信號(hào)強(qiáng)度和穩(wěn)定性的組合最適合您的實(shí)驗(yàn) [ 例如，Nano-Glo^??Extended Live Cell Substrate Trial Pack (Cat.#N2590)]。

選擇最佳的信號(hào)強(qiáng)度和穩(wěn)定性組合

Nano-Glo^? Endurazine? 和 Vivazine? 底物與 Nano-Glo^? 活細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)比較。將PGK 啟動(dòng)子啟動(dòng)的NanoLuc^? 螢光素酶載體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染到 HEK293 細(xì)胞中，使用不同的檢測(cè)試劑檢測(cè)長(zhǎng)時(shí)間的發(fā)光信號(hào)變化。

長(zhǎng)時(shí)程檢測(cè)報(bào)告基因活性

比較 Nano-Glo^? Endurazine? 和 Vivazine^? 72 小時(shí)的信號(hào)。將編碼由 HSV-TK 啟動(dòng)子表達(dá)的 NanoLuc^? 螢光素酶的質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染到 HEK293 細(xì)胞中，并測(cè)量 72 小時(shí)內(nèi)的發(fā)光信號(hào)強(qiáng)度。