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產(chǎn)品技術(shù)介紹手冊(cè)
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HaloTag蛋白標(biāo)簽-蛋白標(biāo)記與分析應(yīng)用Promega公司的HaloTag?技術(shù),這是一種通過在目標(biāo)蛋白上添加HaloTag?標(biāo)簽,然后使用特異性配基進(jìn)行共價(jià)結(jié)合從而進(jìn)行蛋白標(biāo)記和分析的方法。該技術(shù)不僅適用于細(xì)胞成像、蛋白純化和互作分析等領(lǐng)域,還能進(jìn)行蛋白降解的研究,并支持各種實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),如活細(xì)胞和固定細(xì)胞成像、蛋白定位和運(yùn)輸、轉(zhuǎn)位研究以及流式細(xì)胞分選等。資料詳細(xì)說明了HaloTag?表達(dá)載體的選擇、配基種類及其應(yīng)用、實(shí)驗(yàn)步驟和具體案例分析,突出了HaloTag?技術(shù)在蛋白研究中的多功能性和靈活性。通過引入可定制的HaloTag?配基及抗體,研究人員可以根據(jù)具體需求設(shè)計(jì)適合的標(biāo)記方案,進(jìn)而開展更深入的蛋白功能研究。此外,還提到利用HaloTag?技術(shù)進(jìn)行的蛋白周轉(zhuǎn)和脈沖追蹤研究,展示了該技術(shù)在監(jiān)測(cè)蛋白合成與降解方面的潛力。總的來說,HaloTag?技術(shù)為生物醫(yī)學(xué)研究提供了一個(gè)強(qiáng)有力的工具,尤其對(duì)于那些需要高靈敏度和高特異性的蛋白分析項(xiàng)目來說更是如此。
分類:蛋白分析
上傳時(shí)間:2024年12月20日
資料性質(zhì):技術(shù)介紹手冊(cè)
語(yǔ)言:中文
文件大小:1.9M
資料相關(guān)產(chǎn)品
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pHTC HaloTag? CMV-neo Vector
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簡(jiǎn)單的多克隆位點(diǎn)(MCS)質(zhì)粒
C末端HaloTag?載體
用于傳統(tǒng)克隆G7711
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pFC27A-and-pFC27K-HaloTag?-CMV-neo-Flexi?-Vectors
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HaloTag? C末端Flexi?載體用于蛋白編碼序列的方向性克隆
在Flexi?載體間進(jìn)行蛋白編碼區(qū)域轉(zhuǎn)移,無需重新測(cè)序
載體可選抗性氨芐青霉素(A)或卡那霉素(K)G8421,G8431
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pFC14A and pFC14K HaloTag? CMV Flexi? Vectors
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將HaloTag添加到融合的伴侶蛋白的C末端
在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)組成型蛋白表達(dá)
包含CMV即刻-早期增強(qiáng)子/啟動(dòng)子
適用于穩(wěn)定或瞬時(shí)基因表達(dá)G9651,G9661
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pHTN HaloTag? CMV-neo Vector
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多克隆位點(diǎn)(MCS)質(zhì)粒,用于傳統(tǒng)克隆
使用CMV啟動(dòng)子在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)高水平的組成型蛋白表達(dá)
多克隆區(qū)域便于克隆
適用于瞬時(shí)或穩(wěn)定基因表達(dá)G7721
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pFN28A-and-pFN28K-HaloTag?-CMV-neo-Flexi?-Vectors
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添加N末端標(biāo)簽以在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)高水平蛋白表達(dá)
在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)組成型蛋白表達(dá)
包含CMV即刻-早期增強(qiáng)子/啟動(dòng)子
適用于穩(wěn)定或瞬時(shí)基因表達(dá)G8441,G8451
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pFN21A-and-pFN21K-HaloTag?-CMV-Flexi?-Vectors
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將HaloTag?添加到融合的伴侶蛋白的N末端
在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)組成型蛋白表達(dá)
包含CMV即刻-早期增強(qiáng)子/啟動(dòng)子
適用于穩(wěn)定或瞬時(shí)基因表達(dá)G2821
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pH6HTN and pH6HTC His6HaloTag? T7 Vectors
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用于大腸桿菌和無細(xì)胞蛋白表達(dá)的雙蛋白融合標(biāo)簽克隆載體
可以選擇N-或C-末端融合選項(xiàng)
使用聚組氨酸標(biāo)簽或HaloTag? ORF進(jìn)行蛋白表達(dá)和分析
通過PCR或限制性內(nèi)切酶消化克隆蛋白編碼區(qū)G8031,G7971
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pFN29 and pFC30 His6HaloTag? T7 Flexi? Vectors
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HaloTag?-6xHis 雙標(biāo)簽細(xì)菌表達(dá)載體
可在大腸桿菌T7無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)蛋白
將HaloTag?技術(shù)的蛋白質(zhì)溶解性和標(biāo)記優(yōu)勢(shì)與Ni-親和技術(shù)的可重復(fù)使用性和通量相結(jié)合
選擇N-或C-末端標(biāo)簽,以及氨芐青霉素或卡那霉素抗性G8321,G8381,G8261,G8331
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Janelia Fluor? HaloTag? Ligands
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Janelia Fluor? HaloTag? Ligands適用于活細(xì)胞高分辨率成像和標(biāo)準(zhǔn)共聚焦成像
可進(jìn)行快速單分子標(biāo)記
具有高信噪比與特異性
相較于熒光蛋白增強(qiáng)了亮度
凍干配體在細(xì)胞培養(yǎng)基或水性緩沖液中可溶
每一份五瓶包裝的凍干粉配體產(chǎn)品包含5份1nmol每瓶的小劑量配體GA1110,GA1111,GA1120,GA1121,HT1040,HT1070,HT1060,HT1020,HT1010,HT1110,HT1050,HT1030,HT1100,HT1080,HT1090
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HaloTag ? Fluorescent Ligands
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將熒光標(biāo)簽或親和標(biāo)簽共價(jià)連接到膜蛋白或細(xì)胞內(nèi)蛋白
細(xì)胞通透性的TMR、Oregon Green?、diAcFAM和香豆素配體可以輕易穿過細(xì)胞膜以標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)蛋白
非細(xì)胞通透性的標(biāo)簽,如Alexa Fluor? 488和660,現(xiàn)在以新的凍干形式提供
凍干配體可溶于細(xì)胞培養(yǎng)基或水性緩沖液中G1002,G1001,G2801,G2802,G8471,G8472,G8281,G8282,G8581,G8582,G8272,G8273,G8591,G8592,G3221,G2991,G8251,G8252,HT1120,HT1130
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ProNex? DNA QC Assay ABI 7500 7500FAST
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評(píng)估降解樣本中g(shù)DNA的質(zhì)量和數(shù)量
具有內(nèi)部陽(yáng)性對(duì)照的人類特異性、基于多重探針的qPCR檢測(cè)
檢測(cè)75bp、150bp和300bp的人類基因組DNA序列
評(píng)估您的樣本的可擴(kuò)增性并預(yù)測(cè)下游實(shí)驗(yàn)的成功率NG1002,NG1003,NG1001
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HaloTag? Ligand Building Blocks
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使任何帶有指定功能團(tuán)的報(bào)告基因、蛋白質(zhì)或核酸能夠與HaloTag?蛋白一起使用
對(duì)表達(dá)HaloTag?蛋白或蛋白融合體的活細(xì)胞或固定細(xì)胞成像
分析翻譯后修飾
分離蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)復(fù)合物P1691,P6711,P6741,P6751
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Anti-HaloTag? pAb
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用于檢測(cè)HaloTag?融合蛋白的多克隆兔抗體
特異性針對(duì)HaloTag?蛋白
對(duì)大腸桿菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞提取物交叉反應(yīng)低
供應(yīng)濃度為1mg/mlG9281
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Anti-HaloTag? Monoclonal Antibody
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針對(duì)HaloTag?蛋白的單克隆抗體
與其他非HaloTag?蛋白交叉反應(yīng)極小
可通過Western blot檢測(cè)到低至0.5–1ng的HaloTag?融合蛋白
供應(yīng)濃度為1mg/mlG9211
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HaloLink? Resin
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HaloTag?融合蛋白與固體表面的共價(jià)、定向結(jié)合
共價(jià)結(jié)合使得可以進(jìn)行嚴(yán)格的洗滌,從而最小化非特異性背景
快速的結(jié)合動(dòng)力學(xué)增強(qiáng)了蛋白質(zhì):蛋白質(zhì)相互作用的檢測(cè),使得在低蛋白濃度下也能進(jìn)行結(jié)合
一毫升樹脂可以結(jié)合超過7毫克的HaloTag?融合蛋白G1912,G1913,G1914,G1915
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HaloTag? Protein Purification System
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以共價(jià)方式高效且特異性地捕獲您感興趣的蛋白質(zhì)
可用于純化HaloTag? 融合蛋白,HaloTag? 是一種新型蛋白標(biāo)簽, 能夠增強(qiáng)重組蛋白的表達(dá)產(chǎn)率和可溶性
克服與親和標(biāo)簽相關(guān)的限制(例如,低表達(dá)水平蛋白質(zhì)的捕獲效果差、洗滌過程中蛋白質(zhì)的損失)
提供樣品規(guī)格(目錄號(hào):G6270)G6280,G6270
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HaloTag? Protein Purification System
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與HaloTag?配體一起使用,增強(qiáng)重組蛋白的表達(dá)和溶解性
共價(jià)、高效和特異性地捕獲您感興趣的蛋白質(zhì)
克服親和力標(biāo)簽相關(guān)的限制(例如,低表達(dá)水平蛋白質(zhì)的捕獲不良,洗滌過程中的蛋白質(zhì)丟失)
提供樣品大小(選擇Cat.# G6270)G6270,G6280
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HaloTag? Mammalian Protein Purification System
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從哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物中高效純化重組蛋白,即使是低表達(dá)水平
HaloLink?樹脂可共價(jià)結(jié)合>7mg/ml的HaloTag?融合蛋白(容量是FLAG?的10倍)
易于放大或縮小規(guī)模,獲得毫克級(jí)以上的蛋白量
可選擇純化、純化+檢測(cè)或樣本純化+檢測(cè)試劑盒G6790,G6795
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HaloTag? Mammalian Protein Purification System
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從哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物中回收高純度的重組蛋白,即使在低表達(dá)水平下
HaloLink?樹脂共價(jià)結(jié)合>7mg/ml的HaloTag?融合蛋白(比FLAG?高10倍的容量)
易于放大或縮小以獲得毫克級(jí)以上的蛋白質(zhì)量
可選擇純化或純化+檢測(cè)試劑盒G6795,G6790
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Magne? HaloTag? Beads
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磁性捕獲HaloTag?融合蛋白用于沉淀和純化
每毫升顆粒可結(jié)合≥20毫克的純化HaloTag?融合蛋白
適用于手動(dòng)或高通量應(yīng)用G7281,G7282
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HaloTag? Mammalian Pull-Down Systems
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鑒定更多生理相關(guān)的蛋白互作伴侶
直接從裂解液中快速捕獲簡(jiǎn)單和高階的蛋白復(fù)合物,包括瞬時(shí)的或弱相互作用的伴侶蛋白
使用同一構(gòu)建體,從pull-down實(shí)驗(yàn)無縫過渡到成像研究
HaloTag? Mammalian Pull-Down and Labeling System(HaloTag? 哺乳動(dòng)物 Pull-Down 和標(biāo)記系統(tǒng),Cat.# G6500)包含 G6504 的全部組分,并補(bǔ)加了 HaloTag? TMRDirect? Ligand,從而允許進(jìn)行相關(guān)的細(xì)胞定位和實(shí)時(shí)成像研究。G6509,G6500,G6504,G6591
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HaloTag? Mammalian Pull-Down Systems
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識(shí)別更多生理性相關(guān)的蛋白質(zhì)伴侶
直接從裂解物中快速捕獲簡(jiǎn)單和復(fù)雜的蛋白質(zhì)對(duì)
使用相同的載體實(shí)現(xiàn)從pull-downs到成像研究G6509,G6591,G6500,G6504
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NanoBRET? PPI Starter Systems
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基于BRET的測(cè)定,用于檢測(cè)活細(xì)胞中的蛋白-蛋白相互作用
使用全長(zhǎng)蛋白研究蛋白相互作用的誘導(dǎo)和抑制,表達(dá)水平符合生理相關(guān)性
啟動(dòng)系統(tǒng)提供融合載體、陽(yáng)性對(duì)照和檢測(cè)試劑,用于構(gòu)建PPI檢測(cè)
活細(xì)胞檢測(cè)選項(xiàng)用于終點(diǎn)和動(dòng)力學(xué)分析N1821,N1811
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Flexi? Cloning System
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定向克隆蛋白編碼序列
可從多種初始應(yīng)用中進(jìn)行選擇(例如細(xì)菌蛋白、哺乳動(dòng)物蛋白或無細(xì)胞蛋白表達(dá)),然后根據(jù)需要轉(zhuǎn)移插入片段
高效的插入片段轉(zhuǎn)移意味著可直接使用重組克隆,篩選背景克隆所需時(shí)間極少
適用于高通量格式,可用于大型篩選項(xiàng)目C9320,C8640,C8820
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Flexi? Cloning System
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蛋白編碼序列的方向性克隆
多種初始應(yīng)用(例如,細(xì)菌蛋白、哺乳動(dòng)物或無細(xì)胞蛋白表達(dá))可以選擇,之后還可根據(jù)需要轉(zhuǎn)移插入片段到其他應(yīng)用系統(tǒng)
高效的插入片段轉(zhuǎn)移意味著可以直接使用重組克隆,最小化篩選背景菌落的時(shí)間
適用于高通量模式的大型篩選項(xiàng)目C8640
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HaloPROTAC3
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HaloTag? 融合蛋白的小分子降解劑
特異性和可控的蛋白質(zhì)降解
使用HaloTag?熒光配基,通過FACS?分選技術(shù)對(duì)CRISPR/Cas9 HaloTag?編輯細(xì)胞進(jìn)行特異性富集
通過將HiBiT標(biāo)簽添加到HaloTag?融合蛋白中,可以方便地進(jìn)行蛋白降解的發(fā)光檢測(cè)GA3110,GA4110
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